【48812】EMSA试验办法及检测陈述模板
1试验意图:用生物素符号的DNA探针与样本蛋白结合,通过PAGE胶电泳后结合了蛋白质的复合物比未结合蛋白质的探针电泳的速度要慢;然后判别该DNA序列是否和蛋白结合。
3、 然后参加符号好的探针,混匀,在 PCR 仪上 37℃反响 20 分钟。
3、 将带正电的尼龙膜放入 0.5×TBE 中平衡 10min。待电泳完成后将加有样品的整块胶取下电转。转膜缓冲液为预冷的 0.5×TBE,300mA 转印 30分钟;
1、 交联好的尼龙膜参加适量封闭液,于摇床上孵育20 分钟(65转/min);
4、 将膜从洗涤液中取出,略微吸干上面的液体,放入化学发光仪的载物台上,参加ECL工作液彻底掩盖尼龙膜,室温静置2-3 分钟;接着进行信号收集。
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