经过染色质免疫沉淀的方法：用HIF1A抗体共沉淀样本中HIF1A蛋白及与其互作DNA；然后收回纯化 DNA, qPCR做多元化的剖析，验证该转录因子是否与启动子结合及结合方位。

　　a.取1g安排，在液氮中将资料充沛研磨；将研磨粉末参加到装有10mlPBS的离心管中，涡旋振动混匀；

　　a. 将一（e）中的样品在冰上孵育10min，（3000g，4°，5min）离心，弃上清；

　　g. 纯化 DNA;并电泳承认片段主带是否在200~500bp（若片段过长，则添加打断时刻持续优化片段化条件）

　　a.取40ul作为10%的INPUT，于-80℃冻存备用；取400ul参加意图抗体作为IP组，另取一管400ul参加IgG作为IgG做，4°旋转孵育过夜；

　　d. 把洗刷好的磁珠参加到过夜孵育的抗体-蛋白混合物中，4°旋转孵育2h；

　　e. 将样品置于磁力架上，弃上清。用1 ml 低盐洗刷液到微珠中进行洗刷，4°C 下旋转孵育 5 分钟。再重复洗刷两次，以保证一共进行 3 次低盐洗刷。；

　　f. 将样品置于磁力架上，弃上清;用1 ml 高盐洗刷液到微珠中进行洗刷，4°C 下旋转孵育 5 分钟；

　　g. 将样品置于磁力架上，弃上清;用1 ml LiCl洗刷液到微珠中进行洗刷，4°C 下旋转孵育 5 分钟；

　　h. 将样品置于磁力架上，弃上清。用1 ml TE缓冲液到微珠中进行洗刷, 将样品置于磁力架上，弃上清；

　　j. 65°C下孵育30min，并不时震动，将染色质从Beads 上洗脱下来;

　　k. 时间短离心搜集液体于管底，将样品置于磁力架上，搜集上清液于新的EP管中；

　　广州按期生物技能有限公司成立于2016年，一直以探究科学、服务客户为己任；致力于为高校、科研院所、医院、制药公司能够供给全面、快捷、专业的技能服务和产品。技能方面咱们专心于生物医学范畴：企业具有完善的技能服务渠道，掩盖分子生物学，转录组学、代谢组学、蛋白组学，表观遗传等多个科研渠道。在产品方面，自主研讨多种类型科研试剂盒20多项，如：COIP、CHIP、RIP等科研检测试剂盒，较之同类型的进口试剂盒，极大的降低了科研本钱。